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Parasites & Vecteurs volume 16, Numéro d'article : 299 (2023) Citer cet article

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Six espèces de parasites apicomplexes du genre Babesia, à savoir B. microti, B. divergens, B. duncani, B. motasi, B. crassa-like et B. venatorum, sont considérées comme les principaux agents responsables de la babésiose humaine chez les populations endémiques. zones. Ces six espèces possèdent des degrés variables de virulence pour leurs hôtes principaux. L’identification précise de ces espèces est donc essentielle pour l’adoption de stratégies thérapeutiques appropriées.

Nous avons développé une approche de fusion PCR-haute résolution (qPCR-HRM) en temps réel ciblant le gène de l'ARN ribosomal 18S de cinq Babesia spp. basé sur la température de fusion (Tm) et les valeurs du pourcentage de confiance du génotype. Cette approche a ensuite été évaluée à l’aide de 429 échantillons de sang prélevés sur des patients ayant des antécédents de morsures de tiques, de 120 échantillons d’ADN mélangés à des plasmides et de 80 échantillons d’animaux infectés en laboratoire.

La sensibilité et la spécificité de la méthode qPCR-HRM proposée étaient respectivement de 95 % et 100 %, et la limite de détection était de 1 à 100 copies du plasmide avec le gène cible cloné. Le niveau de détection dépendait de l’espèce de Babesia analysée. Les amorces conçues dans cette étude ont assuré non seulement la haute spécificité interspécifique de notre méthode proposée, mais également une grande polyvalence pour différents isolats de la même espèce dans le monde. De plus, la Tm obtenue à partir de l'étalon plasmidique préparé est théoriquement adaptée à l'identification des isolats de toutes les séquences connues des cinq espèces de Babesia.

La méthode de détection développée constitue un outil utile pour l’enquête épidémiologique de la babésiose humaine et le dépistage pré-transfusionnel.

La babésiose humaine causée par les espèces Babesia, qui sont des protozoaires sanguins appartenant à la famille des Babesiidae (ordre des Piroplasmida ; Phylum Apicomplexa) [1], est une maladie réémergente transmise par les tiques. Les cas d'infection à Babesia transmise par transfusion ou naturellement acquis chez l'homme représentent un problème de santé publique grave et ont été fréquemment signalés dans le monde ces dernières années [2, 3]. Les agents pathogènes responsables de la babésiose humaine sont principalement transmis par piqûres de tiques et transfusion sanguine et rarement par voie périnatale et transplantation d'organes [4,5,6,7,8]. À ce jour, plus de 100 espèces de Babesia ont été identifiées dans le monde [9].

Babesia spp. on pensait auparavant qu’elles n’infectaient que les animaux sauvages et domestiques. Cependant, en 1957, le premier cas d’infection humaine par Babesia a été signalé en Yougoslavie [10], et la maladie est progressivement devenue une nouvelle maladie parasitaire mondiale chez l’homme, susceptible de constituer une menace pour la santé des personnes dont le système immunitaire est plus faible. Six espèces de Babesia, à savoir B. microti, B. venatorum, B. divergens, B. duncani, B. motasi et B. crassa-like, sont bien connues comme les principaux agents pathogènes responsables de la babésiose humaine (11, 12). La majorité des cas de Babesia aux États-Unis sont causés par B. microti, dans les zones où la maladie est endémique, mais B. duncani et B. divergens sont également répandus aux États-Unis [13]. En Europe, B. divergens se trouve principalement en France et en Irlande [12, 14], B. venatorum a été signalé en Autriche, en Allemagne, en Italie et en Suède [14,15,16] et des infections de type B. crassa ont été signalées. en Slovénie et en France [17, 18]. En Asie, B. venatorum et B. crassa-like sont principalement signalés en Chine (19, 20). Cependant, des cas de B. microti ont été signalés dans le sud-ouest de la Chine, le long de la frontière avec le Myanmar, à Taiwan et au Japon (21,22,23,24,25). La souche KO1 de Babesia motasi (DQ3466955) est distribuée en Corée (12, 26). Les séquences de B. motasi KO1 et Babesia sp. Les souches KCDC-1 (MK930513) isolées de deux cas humains en Corée du Sud ont montré une grande similitude avec la séquence de la souche B. motasi hebeiensis en Chine (26). Il a également été observé que B. duncani, qui a été signalé pour la première fois dans l'État de Washington, aux États-Unis, est désormais répandu au Canada [27,28,29].